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上?;鄯f生物科技有限公司是一家專注于生物醫(yī)藥的科研產(chǎn)品研究、開發(fā)、生產(chǎn)和銷售的高科技企業(yè)。公司自成立以來便一直秉承“精品、專業(yè)、誠信、便捷”的宗旨和理念,不斷的開拓進(jìn)取,務(wù)實(shí)創(chuàng)新,收錄與典藏了近千種各類細(xì)胞株/系,其中自主研發(fā)建系各類示蹤細(xì)胞、耐藥株細(xì)胞、基因敲除細(xì)胞等百余種,客戶遍及全國各地的醫(yī)院、高校、藥廠、科研機(jī)構(gòu)等,產(chǎn)品質(zhì)量與/服務(wù)體系深受廣大客戶信任和青瞇。目前公司以細(xì)胞生物學(xué)產(chǎn)品為主體,陸續(xù)建立與開發(fā)了:無外泌體血清Exosome-free FBS、Exosome研究分離與純化試劑盒、靶向Exosome慢病毒載體、CT產(chǎn)品( 干細(xì)胞通路調(diào)控化合物)等新產(chǎn)品和技術(shù)體系,以期為廣大客戶提供更多更好的科研產(chǎn)品和服務(wù)。誠為基質(zhì)為本協(xié)為贏,慧穎生物期待與您的合作!
產(chǎn)品名稱:小鼠卵巢癌細(xì)胞株ID8
生長特性: 貼壁生長
細(xì)胞來源: 從ATCC/中科院/協(xié)和醫(yī)院引進(jìn)
培養(yǎng)液: 1640+10%FBS(SERANA或SERANA)
細(xì)胞總數(shù): 1~3*106
傳代周期: 2-3天
傳代比例: 1:2~1:4
換液頻率: 2-3天
凍存液: 90%FBS+10%DMSO
細(xì)胞狀態(tài): 良好
對(duì)于小鼠卵巢癌細(xì)胞株ID8細(xì)胞,若收到后細(xì)胞漂?。号囵B(yǎng)瓶不開封,用75%酒精擦拭后平躺置于培養(yǎng)箱內(nèi)。次日觀察,如細(xì)胞大部分又貼回瓶底,表明細(xì)胞活力正常,剩余漂浮的細(xì)胞可以去掉,換成新鮮的培養(yǎng)基;如細(xì)胞還不貼壁,將細(xì)胞離心收集移到新的培養(yǎng)瓶中,原培養(yǎng)瓶加部分新鮮培養(yǎng)液繼續(xù)培養(yǎng),中間注意觀察,我們的技術(shù)人員會(huì)一直跟蹤指導(dǎo),直到問題解決。對(duì)于懸浮細(xì)胞:收到細(xì)胞后,將細(xì)胞全部離心,去掉舊的培養(yǎng)基,換成新鮮的培養(yǎng)基繼續(xù)培養(yǎng)。
特別注意:(如使用公共實(shí)驗(yàn)室或者初次接觸,建議添加雙抗培養(yǎng))
(1)貼壁細(xì)胞收到當(dāng)天有少量或沒有飄忽的細(xì)胞可以當(dāng)天換液,因?yàn)槁吠绢嶔ぴ斐纱罅匡h忽的情況時(shí),請將細(xì)胞換液后放置培養(yǎng)箱孵育到第二天再做消化傳代,請優(yōu)先選擇直徑6cm的培養(yǎng)皿進(jìn)行傳代培養(yǎng)
(2)收到細(xì)胞后請盡快更換為含10%血清的新鮮培養(yǎng)基,如因特殊情況需要繼續(xù)使用原瓶,請?jiān)谠颗囵B(yǎng)基中額外添加10%的血清,(原瓶培養(yǎng)基的繼續(xù)使用時(shí)間zui長不宜超過72小時(shí))
(3)如簽收時(shí)出現(xiàn)培養(yǎng)瓶壁破裂,漏液等情況請及時(shí)做好照片記錄并SUER技術(shù)人員
細(xì)胞接收后的操作流程與注意事項(xiàng):
1)貼壁細(xì)胞生長緩慢;適當(dāng)提高血清濃度(zui高不能超過20%),或可根據(jù)該細(xì)胞生長特性生長密度,考慮胰酶消化后,轉(zhuǎn)移到新的培養(yǎng)瓶繼續(xù)培養(yǎng)
2)如果細(xì)胞為貼壁細(xì)胞,而收到時(shí)呈懸浮或者部分懸浮的狀態(tài),請將懸浮的細(xì)胞即時(shí)離心,加15%血清的*培養(yǎng)基到新的培養(yǎng)皿/瓶繼續(xù)培養(yǎng)3天;同時(shí)原培養(yǎng)瓶中剩下的貼壁細(xì)胞更換為15%血清的*培養(yǎng)基培養(yǎng)3天。3天后若原瓶或者新瓶中的細(xì)胞都沒有出現(xiàn)增值而是繼續(xù)脫落死亡,請及時(shí)實(shí)驗(yàn)室技術(shù)人員會(huì)跟進(jìn)解決
3)生長不均:貼壁細(xì)胞若出現(xiàn)分布不均,成島狀生長,可將細(xì)胞進(jìn)行消化,重懸打散細(xì)胞,加入新鮮培養(yǎng)基進(jìn)行培養(yǎng)
細(xì)胞常規(guī)培養(yǎng)傳代流程(請嚴(yán)格遵照無菌操作)
(1)吸出原培養(yǎng)瓶中的培養(yǎng)基,PBS緩沖液潤洗細(xì)胞兩次,加2-3ml 0.25%胰酶進(jìn)行消化細(xì)胞(注意把握消化時(shí)間,通??刂圃?-2min)
(2)注意培養(yǎng)基PH值變化情況,定期換液(每周2-3次),待細(xì)胞密度達(dá)到80%以后重復(fù)1項(xiàng)操作或者凍存
(3)取部分細(xì)胞懸液轉(zhuǎn)移到新的培養(yǎng)皿/瓶中,添加適當(dāng)?shù)?培養(yǎng)基,把細(xì)胞懸液打勻,于培養(yǎng)箱中培養(yǎng)
(4)鏡下觀察消化情況,在HS505.T人淋巴結(jié)成纖維樣細(xì)胞生長特性邊緣縮小,貼壁松動(dòng)時(shí)(不建議消化到細(xì)胞漂?。┤サ粢让福?-8ml*培養(yǎng)基,輕輕吹打細(xì)胞層,盡量把細(xì)胞層吹落,吹散。
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血清和血漿Exosome分離純化產(chǎn)品
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靶向Exosome慢病毒載體
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ExoPerfectTM pTExo-GFP 慢病毒載體
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ExoPerfectTM Exo-free FBS (50ML)
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