人結(jié)腸癌細(xì)胞系：SW48細(xì)胞，SW480細(xì)胞，CACO-2細(xì)胞，SW620細(xì)胞，HCT-8細(xì)胞，HCT/V細(xì)胞，HCT-116細(xì)胞，LoVo細(xì)胞，HRT-18細(xì)胞，HT-29細(xì)胞等

人宮頸癌細(xì)胞系：hela細(xì)胞，HT-3細(xì)胞，C33A細(xì)胞，SN12C細(xì)胞，SKG-IIIa細(xì)胞，Hela S3細(xì)胞，DoTc2-4510細(xì)胞，Ca Ski細(xì)胞 ，ME-180細(xì)胞等

DC2.4細(xì)胞株  MC38細(xì)胞株，MLE-12細(xì)胞，bEND.3細(xì)胞 HT-22細(xì)胞，HK-2細(xì)胞 THP-1細(xì)胞 WRO細(xì)胞 FRO細(xì)胞 Molt-4細(xì)胞系 SH-SY-5Y細(xì)胞 U87-MG細(xì)胞

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慧穎細(xì)胞庫(kù)提供SKMEL-2細(xì)胞|ATCC引進(jìn)|人惡性黑色素瘤細(xì)胞，復(fù)蘇細(xì)胞、凍存細(xì)胞均可提供。全國(guó)各地均可發(fā)貨，全國(guó)統(tǒng)一價(jià)格，原至澳門、香港、新疆、內(nèi)蒙古、福建、寧夏等地區(qū)。提供SHIN3細(xì)胞的來源背景|特征特性|生長(zhǎng)狀態(tài)|細(xì)胞形態(tài)|代數(shù)|價(jià)格|培養(yǎng)條件|操作注意事項(xiàng)|售后說明等?；鄯f400多種類細(xì)胞株細(xì)胞系，20株耐藥株，傳代次數(shù)少，活力高，*，深得客戶信賴！

產(chǎn)品名稱：SKMEL-2細(xì)胞

中午名稱：人惡性黑色素瘤細(xì)胞

來源：美國(guó)ATCC

種屬：人

來源：皮膚

生長(zhǎng)狀態(tài)：貼壁生長(zhǎng)

細(xì)胞形態(tài)：多邊形

代數(shù)：3-5代

數(shù)量：大量

庫(kù)存狀態(tài)：現(xiàn)貨

質(zhì)控：無污染、無支原體、符合標(biāo)準(zhǔn)

SKMEL-2細(xì)胞|ATCC引進(jìn)|人惡性黑色素瘤細(xì)胞復(fù)蘇操作步驟：

1.佩戴眼鏡和手套，從液氮罐中取出安瓿或冷凍管。

2.迅速放入38℃水浴中，并不時(shí)搖動(dòng)，在1分鐘內(nèi)使其*融化，然后在無菌下取出細(xì)胞。

3.在1000r/min速度下離心5～10分鐘，棄去上層液，加入適量培養(yǎng)液后接種于培養(yǎng)瓶中，接種濃度1×109/L，置37℃溫箱靜置培養(yǎng)，次日更換一次培養(yǎng)液，繼續(xù)培養(yǎng)，觀察生長(zhǎng)情況。若細(xì)胞密度較高，及時(shí)傳代。或無需離心直接將細(xì)胞加入瓶中，并加入培養(yǎng)基貼壁培養(yǎng)12～24小時(shí)后，充去上清，換入新鮮培養(yǎng)基繼續(xù)培養(yǎng)。

細(xì)胞復(fù)蘇的注意事項(xiàng)：

1.細(xì)胞復(fù)蘇時(shí)要注意融化凍存細(xì)胞的應(yīng)注意融化凍存細(xì)胞速度要快，可不時(shí)搖動(dòng)安瓿或冷凍管，使之盡快通過zui易受損的溫度段(-5～0℃)。

2.凍存液對(duì)細(xì)胞有毒性，解凍后必須用Dhanks洗兩遍才能移入培養(yǎng)瓶中培養(yǎng)。培養(yǎng)液中血清不能太少。

3.從液氮拿出來，以zui快速度丟入37度水浴，等細(xì)胞液剛剛化完取出，加培養(yǎng)液稀釋。這樣可以避免復(fù)蘇過程中細(xì)胞液中有冰晶的出現(xiàn)，冰晶會(huì)破壞細(xì)胞膜及細(xì)胞內(nèi)部結(jié)構(gòu)的。

4.剛復(fù)蘇的細(xì)胞還是少折騰它好，細(xì)胞37°快速解凍后直接放入預(yù)熱的培養(yǎng)基。

5.DMSO在4度以下對(duì)細(xì)胞無毒，4度以上有毒；復(fù)蘇必須盡快除去。要記得慢凍速溶！

6.取細(xì)胞的過程中注意帶好防凍手套，護(hù)目鏡。細(xì)胞凍存管可能漏入液氮，解凍時(shí)凍存管中的氣溫急劇上升，可導(dǎo)致爆炸。

7.常溫下二甲基亞砜（DMSO）對(duì)細(xì)胞的毒副作用較大，因此，必須在1-2 min內(nèi)使凍存液*融化。如果復(fù)蘇溫度太低，會(huì)造成細(xì)胞的損傷，所以選擇40℃復(fù)蘇。

8.貼壁細(xì)胞復(fù)蘇實(shí)驗(yàn)標(biāo)準(zhǔn)流程是將解凍后的細(xì)胞懸液先進(jìn)行離心，以去除冷凍保護(hù)液DMSO對(duì)細(xì)胞的損傷，但是離心也會(huì)對(duì)剛復(fù)蘇的狀態(tài)欠佳的細(xì)胞產(chǎn)生損傷。也有的實(shí)驗(yàn)操作是將解凍后的細(xì)胞懸液先直接吹打均勻后分裝到培養(yǎng)瓶中進(jìn)行培養(yǎng)，第二天換液。這可能使培養(yǎng)基中少量的DMSO對(duì)細(xì)胞造成損傷。

細(xì)胞復(fù)蘇后貼壁細(xì)胞較少的原因：

1.凍存細(xì)胞的時(shí)候是不是消化時(shí)間過長(zhǎng)，這是一般人注意不到的地方，要知道太長(zhǎng)的消化時(shí)間會(huì)上細(xì)胞復(fù)蘇時(shí)失去鐵壁能力。

2.有可能是細(xì)胞凍存液的原意，細(xì)胞凍存液的質(zhì)量不好也會(huì)導(dǎo)致細(xì)胞死亡。

3.你的凍存液的量加的是不是太多，ATCC推薦是不超過7%，大于5%，太多也不好。

4.你在凍存的時(shí)候是不是把DMSO混均勻，這個(gè)有一些影響，但不算太大。

5.凍存時(shí)溫度梯度是不是把握嚴(yán)格，很多人容易忘卻這個(gè)事情，因?yàn)檫@個(gè)東西流程長(zhǎng)。

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公司所提供的實(shí)驗(yàn)細(xì)胞及其子代，不能用于人體實(shí)驗(yàn)和臨床診斷、治療。

細(xì)胞狀態(tài)不好解決方法：培養(yǎng)基一次不要配太多，根據(jù)用量決定。

細(xì)胞外源微生物的污染：細(xì)胞不宜長(zhǎng)期體外培養(yǎng)，因?yàn)橥庠次⑸镂廴镜膸茁蚀蟠筇岣摺Ｒ装l(fā)現(xiàn)和難發(fā)現(xiàn)的，影響細(xì)胞狀態(tài)。

建議：實(shí)驗(yàn)前凍存一批細(xì)胞，隔幾個(gè)月重新復(fù)蘇。既保證實(shí)驗(yàn)所用細(xì)胞代數(shù)*，又將外源污染的后果降到zui低。

致電或電聯(lián) 咨詢SKMEL-2細(xì)胞的傳代次數(shù)、報(bào)價(jià)、以及技術(shù)咨詢、SKMEL-2細(xì)胞的說明書等等。

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1640培養(yǎng)基（GIBCO,貨號(hào)11875093） +10%進(jìn)口胎牛血清（GIBCO,貨號(hào)10099141）+2mM  L-G(L-谷氨酰胺)+1mM  Sodium pyruvate+10mM   HEPES(gibco.。貨號(hào)。15630-080)

DMEM高糖培養(yǎng)基（GIBCO,貨號(hào)11995065）+10%進(jìn)口胎牛血清（GIBCO,貨號(hào)10099141）+4mM  L-G(L-谷氨酸胺)+1mM （丙酮酸鈉1,HEPES(gibco.。貨號(hào)。15630-080)

E,MEM培養(yǎng)基（GIBCO,貨號(hào)11095080）+10%進(jìn)口胎牛血清（GIBCO,貨號(hào)10099141）+NEAA(非必需氨基酸)+2mM  L-G(L-谷氨酸胺)+1mM （丙酮酸鈉）

F12K培養(yǎng)基 （GIBCO,貨號(hào)11765054）+10%進(jìn)口胎牛血清（GIBCO,貨號(hào)10099141）+2mM  L-G(L-谷氨酸胺)

McCoy's 5a培養(yǎng)基（GIBCO,貨號(hào)16600082）+10%進(jìn)口胎牛血清（GIBCO,貨號(hào)10099141）+1.5mM  L-G(L-谷氨酸胺)

L 15培養(yǎng)基（Hyclone,貨號(hào)SH30525.01）+10%進(jìn)口胎牛血清（GIBCO,貨號(hào)10099141）+1.5mM  L-G(L-谷氨酸胺)

DMEM/F12培養(yǎng)基（GIBCO,貨號(hào)11330032）+10%進(jìn)口胎牛血清（GIBCO,貨號(hào)10099141）+1.5mM  L-G(L-谷氨酸胺)

IMDM培養(yǎng)基（GIBCO,貨號(hào)C12440500BT）+10%進(jìn)口胎牛血清（GIBCO,貨號(hào)10099141）+1.5mM  L-G(L-谷氨酸胺)