庫存現(xiàn)貨：人肺癌細胞，A549細胞，價格/來源 全國各地均可發(fā)貨，全國統(tǒng)一價格，運輸形式：復蘇、凍存以及全血清包被（2ML管子，適合冬季運輸，運輸途中細胞處于休眠狀態(tài)）。

產品名稱：A549細胞

中文名稱：人肺癌細胞

來源：人肺癌

形態(tài)特性：上皮樣

生長特性：貼壁生長

培養(yǎng)基：F-12K 90%, Fetal Bovine Serum 10%

培養(yǎng)條件：37℃ 5% CO2

消化條件：0.25% (w/v) Trypsin-0.53 mM EDTA溶液，消化5-10min

傳化比例：1：3-1：8

換液時間：2-3天換液一次

凍存液比例：85%培養(yǎng)基，10%FBS, 5% (v/v) DMSO

凍存密度：  1-3 ×10^6/管，液氮保存

活力：94％（ViabilitybyTrypanBlueExclusion）

細胞檢測：細胞不含有HIV-1、HBV、HCV、支原體、細菌、酵母和真菌

細胞簡介：A549細胞系由D.J.Griad通過肺癌組織移植培養(yǎng)建系，患者為58歲白人男性。 A549能通過胞苷二磷酸膽堿途徑合成含有高含量不飽和脂肪酸的卵磷脂。

慧穎生物提供400多種細胞系細胞株,以及相應的細胞學實驗服務:血管新生、traswell、劃痕實驗、細胞遷移、克隆形成、細胞凋亡、細胞增殖、細胞周期等。另有：示蹤細胞、穩(wěn)定細胞株構建、細胞代感染、篩藥細胞株產品、篩藥細胞株定制、pathway研究細胞、STR分型鑒定，細胞染色等技術服務提供。咨詢： ！

人肺癌細胞，A549細胞，價格/來源  細胞傳代培養(yǎng)技術：

細胞復蘇

1. 將凍存的細胞取出后迅速放入37℃水浴中，并不時搖動，在一分鐘內使其*融化

2.將細胞吸出放入有培養(yǎng)基的離心管中中，用滴管輕輕吹打混勻，800轉/min，5分鐘離心；棄去上清液，加入培養(yǎng)基，混勻再離心一次，棄液，加入4~5ml 培養(yǎng)基，混勻，移入培養(yǎng)瓶中

細胞換液

1.用舊液體輕輕沖洗培養(yǎng)瓶底，然后用滴管吸盡舊液（棄去）

2.加入PBS1~2ml，輕輕搖晃，然后用滴管吸盡舊液（棄去）

3.如果細胞液比較臟，可以重復步驟2

4.加入新培養(yǎng)基，輕輕搖勻，放入培養(yǎng)箱繼續(xù)培養(yǎng)

細胞傳代

1.用舊液體輕輕沖洗培養(yǎng)瓶底，然后用滴管吸盡舊液（棄去）

2.加入PBS1~2ml，輕輕搖晃，然后用滴管吸盡舊液（棄去）

3.加入約1~1.5ml胰酶，室溫或培養(yǎng)箱中放置4~5分鐘，直到所有貼壁細胞消化下來為止【判斷方法：倒置相差顯微鏡觀察，細胞變圓時就可以終止消化】

4.加入約1ml培養(yǎng)基（含有小牛血清）終止消化

5.用滴管吹洗一次，移入離心管, 800轉/min，5分鐘離心

6.加入培養(yǎng)基，吹打分散細胞，再根據(jù)分傳細胞瓶數(shù)補加一定量的含血清的培養(yǎng)基，制成細胞懸液；分裝至2~3個培養(yǎng)瓶中

7.放入培養(yǎng)箱進行培養(yǎng)

細胞計數(shù)

1.準備好顯微鏡、載玻片、蓋玻片、血細胞計數(shù)板、吸管等儀器設備

2.按照“細胞傳代”中講述的方法制成細胞懸液

3.將細胞懸液取出若干，滴入血細胞計數(shù)板，注意不要有氣泡進入

4.加樣后靜置2~3min后觀察，數(shù)四角大格內的細胞總數(shù)。計數(shù)時應按照一定的路徑，以免遺漏或重復。細胞壓線時計上不計下，計左不計右，計數(shù)2~3次，取平均值

5. 細胞密度 = 四大格中細胞總數(shù)÷4 ×104 = 細胞數(shù)/ml懸液

細胞凍存

1. 重復“細胞傳代”中的消化細胞的步驟，將細胞消化下來，轉移至離心管800轉/min，5分鐘離心，棄液

2. 沉淀中加入凍存液，輕吹制成懸液

3. 分轉到凍存管內，每個1~1.5ml

4. 將凍存管口封嚴

5.貼上標簽，注明凍存時間、細胞種類及代數(shù)

6. 按下列順序降溫，并zui終凍存：室溫→ 4℃ 20min → -20℃ 30min →-70℃凍存

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