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              PANC1 細胞,人胰腺癌細胞 價格/說明書

              • 產(chǎn)品型號:
              • 產(chǎn)品時間:2024-08-13
              • 簡要描述:PANC1 細胞,人胰腺癌細胞 價格/說明書,慧穎提供PANC1 來源,背景資料,細胞形態(tài),培養(yǎng)基,培養(yǎng)條件,細胞詳細說明書以及注意事項等。慧穎細胞庫,擁有完善的細胞庫管理體系,供應(yīng)400多種類細胞株細胞系:國內(nèi)/外優(yōu)質(zhì)細胞供應(yīng),種類齊全,質(zhì)量保證,,100%放心免費售后!自細胞庫成立至今,供應(yīng)于全國各省市地區(qū),擁有北京上海各地中科院研究所,復(fù)旦,瑞金,上藥所等各大小型院校及企業(yè)。
              • 產(chǎn)品簡介

              現(xiàn)貨供應(yīng):PANC1 細胞,人胰腺癌細胞 價格/說明書,詳細信息如下:

              細胞生長:貼壁生長

              細胞形態(tài):上皮樣

              細胞數(shù)量:1×106個細胞數(shù)

              細胞傳代:1:3~1:6傳代每周換液2~3次

              細胞純度:94%

              細胞活力:90%(ViabilitybyTrypanBlueExclusion)

              細胞檢測:細胞不含有HIV-1、HBV、HCV、支原體、細菌、酵母和真菌

              PANC1 細胞,人胰腺癌細胞 價格/說明書 @慧穎細胞庫多年專業(yè)細胞服務(wù)提供優(yōu)質(zhì)的產(chǎn)品,完善的客戶服務(wù)以幫助客戶快速找到的ATCC細胞細胞產(chǎn)品。本產(chǎn)品質(zhì)量保證,選購!

              操作臺的滅菌處理:

              1)無菌室及無菌操作臺(laminarflow)用紫外燈照射30-60分鐘滅菌,70%ethanol擦拭無菌操作抬面,并開啟無菌操作臺風(fēng)扇運轉(zhuǎn)10分鐘。

              2)細胞用的培養(yǎng)基如有相同切記不可共享培養(yǎng)基,以避免失誤混淆或細胞間污染。 (注:實驗操作應(yīng)在抬面之中央無菌區(qū)域,勿在邊緣之非無菌區(qū)域操作。)

              培養(yǎng)細胞將復(fù)合細胞計數(shù)要求的細胞懸液分裝入培養(yǎng)瓶內(nèi),將培養(yǎng)瓶放入37℃和5%CO2的培養(yǎng)箱內(nèi)2-4小時(或者24-48小時)后換液繼續(xù)培養(yǎng)培養(yǎng),換液的時間由細胞情況而定。

              PANC1 細胞,人胰腺癌細胞 價格/說明書 簡單信息:

              細胞來源:  人胰腺癌細胞

              細胞簡介:  PANC-1人胰腺癌細胞,來源于人胰腺癌,中文名為人胰腺癌細胞,正常的細胞形態(tài)為上皮樣,貼壁生長。

              培養(yǎng)基:    DMEM 90%, Fetal Bovine Serum 10%

              培養(yǎng)條件:  37℃ 5% CO2

              消化條件:  0.25% (w/v) Trypsin-0.53 mM EDTA溶液,消化3-5min

              傳化比例:  1:2-1:4

              換液時間:  2-3天換液一次

              凍存液比例:    85%培養(yǎng)基,10%FBS, 5% (v/v) DMSO

              凍存密度:  1-3 ×10^6/管,液氮保存

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              PANC1 細胞,人胰腺癌細胞 價格/說明書的培養(yǎng)

              【初代培養(yǎng)原理】

              將動物機體的各種組織從機體中取出,經(jīng)各種酶(常用胰蛋白酶)、螯合劑(常用EDTA)或機械方法處理,分散成單細胞,置合適的培養(yǎng)基中培養(yǎng),使細胞得以生存、生長和繁殖,這一過程稱原代培養(yǎng)。

              儀器:培養(yǎng)箱(調(diào)整至37℃),培養(yǎng)瓶、青霉素瓶、小玻璃漏斗、平皿、吸管、移液管、紗布、手術(shù)器械、血球計數(shù)板、離心機、水浴箱(37℃)

              材料:動物組織塊

              試劑:1640培養(yǎng)基(含20%小牛血清),0.25%胰酶,Hank′s液,碘酒

              【初代消化培養(yǎng)法】

              (1)準(zhǔn)備:取各種已消毒的培養(yǎng)用品置于凈化臺面,紫外線消毒20分鐘。開始工作前先洗手、75%酒精擦拭手至肘部。

              (2)布局:點燃酒精燈,安裝吸管帽。

              (3)處理組織:把組織塊置于燒杯中,用Hanks液漂洗2~3次,去除血污;如懷疑組織可能污染,可先置于含有青鏈霉素的混合液中30~60分鐘。

              (4)剪切:用眼科剪把組織切成2~3毫米大小的塊,以便于消化。加入比組織塊總量多30~50倍的胰蛋白酶液,然后一并倒入三角燒瓶中,結(jié)扎瓶口或塞以膠塞。

              (5)消化:或用恒溫水浴,或置于37℃溫箱消化均可,消化中每隔20分鐘應(yīng)搖動一次,如用電磁恒溫攪拌器消化更好。消化時間依組織塊的大小和組織的硬度而定。

              (6)分離:在消化過程中見消化液發(fā)混濁時,可用吸管吸出少許消化液在鏡下觀察,如組織已分散成細胞團或單個細胞,立即終止消化,隨即通過適宜不銹鋼篩,濾掉尚未充分消化開的組織塊。低速(500~1000轉(zhuǎn)/分)離心消化液5分鐘,吸出上清,加入適量含有血清的培養(yǎng)液。

              (7)計數(shù):用計數(shù)板計數(shù),如細胞懸液細胞密度過大,再補加培養(yǎng)液調(diào)整后,分裝入培養(yǎng)瓶中。對大多數(shù)細胞來說,pH要求在7.2~7.4范圍,培養(yǎng)液呈微紅色,如顏色偏黃,說明液體變酸,可用NaHCO23調(diào)整。

              (8)培養(yǎng):置于36.5℃溫箱培養(yǎng),如用CO2溫箱培養(yǎng),瓶口需用紗布棉塞或螺旋帽堵塞,紗布塞易生霉菌,每次換液時需要換新塞。

              【初代組織塊培養(yǎng)法】

              《1》剪切:把組織小塊置于小燒杯或青霉素小瓶中,用Hanks液漂洗二三次以去掉表面血污,吸靜Hanks液,用眼科剪反復(fù)剪切1mm3塊為止。

              《2》擺布:用彎頭吸管吸取若干小塊,置于培養(yǎng)瓶中,用吸管彎頭把組織小塊擺布在培養(yǎng)瓶底部,小塊相互距離以0.5cm為宜,每一25ml培養(yǎng)瓶底可擺布20~30塊。

              《3》輕輕翻轉(zhuǎn)培養(yǎng)瓶,另瓶底向上,注意翻瓶時勿另組織小塊流動,塞好瓶塞,置36.5℃溫箱培養(yǎng)2小時左右(勿超過4小時),使小塊微干涸。

              《培養(yǎng)》從微箱中取出培養(yǎng)瓶,開塞,46度斜持培養(yǎng)瓶,箱瓶底腳部輕輕注入培養(yǎng)液少許,然后緩緩再把培養(yǎng)瓶翻轉(zhuǎn)過來,讓培養(yǎng)液慢慢覆蓋附于瓶地上的組織小塊。置溫箱中靜止培養(yǎng)。待細胞從組織塊游出數(shù)量增多后。再補加培養(yǎng)液。

              【傳代培養(yǎng)法原理】

              細胞在培養(yǎng)瓶長成致密單層后,已基本上飽和,為使細胞能繼續(xù)生長,同時也將細胞數(shù)量擴大,就必須進行傳代(再培養(yǎng))。 傳代培養(yǎng)也是一種將細胞種保存下去的方法。同時也是利用培養(yǎng)細胞進行各種實驗的必經(jīng)過程。懸浮型細胞直接分瓶就可以,而貼壁細胞需經(jīng)消化后才能分瓶。

              【材料和試劑】

              1)細胞:貼壁細胞株

              2)試劑:0.25%胰酶、1640培養(yǎng)基(含10%小牛血清)

              3)儀器和器材:倒置顯微鏡,培養(yǎng)箱、培養(yǎng)瓶、吸管、廢液缸等

              【操作步驟】

              1)吸除培養(yǎng)瓶內(nèi)舊培養(yǎng)液。

              2)向瓶內(nèi)加入胰蛋白酶和EDTA混合液少許,以能覆滿瓶底為限。

              3)置溫箱中2~5分鐘,當(dāng)發(fā)現(xiàn)細胞質(zhì)回縮,細胞間隙增大后,立即終止消化。

              4)吸除消化液,向瓶內(nèi)注入Hanks液數(shù)毫升,輕輕轉(zhuǎn)動培養(yǎng)瓶,把殘余消化液沖掉。注意加Hanks液沖洗細胞時,動作要輕,以免把已松動的細胞沖掉流失,如用胰蛋白酶液單獨消化,吸除胰蛋白酶液后,可不用Hanks液沖洗,直接加入培養(yǎng)液。

              5)用吸管吸取營養(yǎng)液輕輕反復(fù)吹打瓶壁細胞,使之從瓶壁脫離形成細胞懸液。

              6)計數(shù)板計數(shù)后,把細胞懸液分成等份分裝入數(shù)個培養(yǎng)瓶中,置溫箱中培養(yǎng)。

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