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RWPE-1細胞株RWPE-1細胞價格 慧穎細胞庫提供傳代 凍存細胞,存活率高,*,復蘇周期短!慧穎提供400多種類細胞株細胞系、耐藥株、原代細胞、熱賣種類有:卵巢癌細胞、乳腺癌細胞、胃癌細胞、肺癌細胞、前列腺、舌鱗癌細胞、結腸癌細胞等,: !
細胞介紹:RWPE-1細胞為人正常前列腺上皮細胞,來源于人正常前列腺,中文名為人正常前列腺上皮細胞,正常的細胞形態(tài)為上皮樣,貼壁生長。腫瘤抑制基因: p53 + [PubMed: 9214605] pRB + [PubMed: 9214605] 一位正常男性前列腺組織切片的周圍區(qū)域的上皮細胞用單拷貝的人乳頭瘤病毒的18(HPV-18)進行轉化,建立了RWPE-1 (ATCC CRL-11609) 細胞株 [PubMed: 9214605]. 在三維Matrigel培養(yǎng)時,在雄激素作用下,RWPE-1細胞形成腺胞并向培養(yǎng)基中分泌PSA。[PubMed: 11170142]. 當與Matrigel或基質細胞混合注射雄性裸鼠時,RWPE。
培養(yǎng)基:這株細胞的基本培養(yǎng)基作為Invitrogen (GIBCO)提供的kit的部分: 角化細胞無血清培養(yǎng)基K-SFM,kit目錄號17005-042。隨kit提供這株細胞生長所需的兩種添加劑(牛垂體提取物BPE及人重組表皮生長因子EGF)。 配制*生長培養(yǎng)基,需添加以下成分: 0.05 mg/ml BPE – 隨K-SFM提供 5 ng/ml EGF -隨K-SFM提供。K-SFM,BPE 0.05mg/ml,EGF 5ng/ml(Gibco試劑盒17005-042)。
培養(yǎng)條件:37℃ 5% CO2
消化條件:洗滌:不含Ca++/Mg++離子的D-PBS;消化:溶于D-PBS的0.05% (w/v) Trypsin-0.53mM EDTA溶液,消化5-10min,不能拍打培養(yǎng)皿, 需要靜止自然消化;中和:0.1% 大豆胰蛋白酶抑制子或含2%FBS的D-PBS;離心125×g, 5~7min
傳化比例:1:3-1:5
換液時間:2天換液一次
凍存液比例:85%培養(yǎng)基,10%FBS, 10% (v/v) DMSO
凍存密度:1-3 ×10^6/管,液氮保存
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慧穎運輸:短途運輸問題不大??墒情L途天熱時,我們要做好相應的運輸安全措施?;罴毎倪\輸方法相對比較簡單,a)將該瓶細胞裝滿培養(yǎng)基,這樣做的目的是讓所有細胞都始終有營養(yǎng)供給。b)用酒精擦拭培養(yǎng)瓶,瓶口用封口膜包好。c)細胞取回后,半量換液。冬天則是采用全血清包被細胞運輸,細胞運輸中處于休眠狀態(tài),收到細胞以后,用75%酒精噴灑整個管子消毒后放到超菌臺內,嚴格無菌操作;然后將小管細胞轉移至T25培養(yǎng)瓶,加入5ml左右含F(xiàn)BS的培養(yǎng)基混勻,放入培養(yǎng)箱隔夜培養(yǎng)后查看細胞匯合度:若未超過80%匯合度,換液繼續(xù)培養(yǎng),根據情況傳代或者凍存。若超過80%匯合度,可直接進行傳代。
對于RWPE-1細胞株RWPE-1細胞價格貼壁細胞應先吸(倒)盡培養(yǎng)基,吸的越干凈越好,以免中和后加入的消化液,使強度減弱(或PBS洗1-3次)。50ml培養(yǎng)瓶加入消化液約1-3ml,按此比例進行消化,(根據經驗),晃動使消化液鋪均勻置37度培養(yǎng)箱約2-5分鐘,鏡下見細胞收縮變圓或少數(shù)脫落后,輕輕振動瓶底使細胞全部脫落,加入2-3ml*培養(yǎng)基后,輕輕吹打,使細胞基本成單個懸浮,然后分置其它無菌培養(yǎng)瓶內,加入*培養(yǎng)基后繼續(xù)培養(yǎng)或實驗。