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庫存現(xiàn)貨 復(fù)蘇 凍存形式 全國各地均可發(fā)貨,全國統(tǒng)一*格 國外引進(jìn)BEL-7402細(xì)胞|慧穎科研用|人肝癌細(xì)胞 慧穎熱銷中!
產(chǎn)品名稱:BEL-7402細(xì)胞
中文名稱:人肝癌細(xì)胞
培養(yǎng)基:RPMI-1640 90%, Fetal Bovine Serum 10%
培養(yǎng)條件:37℃ 5% CO2
消化條件:0.25% (w/v) Trypsin-0.53mM EDTA 溶液,消化 5-10min
傳化比例:1:3 -1:5
換液時(shí)間:2-3 天換液一次
凍存液比例:85%培養(yǎng)基,10%FBS, 5% (v/v) DMSO
凍存密度:1-3 ×10^6/管,液氮保存
細(xì)胞介紹:BEL-7402 細(xì)胞為人肝癌細(xì)胞,來源于人肝癌,中文名為人肝癌細(xì)胞, 正常的細(xì)胞形態(tài)為上皮樣,貼壁生長。BEL-7402細(xì)胞株是1974年從臨床肝癌手術(shù)標(biāo)本中建立的。 細(xì)胞群體倍增時(shí)間為20小時(shí)。 移植到處理過的wistar大鼠中的能形成腫瘤結(jié)節(jié)。 細(xì)胞形態(tài)呈上皮樣細(xì)胞。 在電子顯微鏡下亦顯示上皮細(xì)胞所具有的橋粒和張力原纖維,與臨床肝癌細(xì)胞相似。 分瓶培養(yǎng)第四天時(shí),其有絲分裂指數(shù)約為7%。 BEL-7402細(xì)胞的染色體數(shù)為不足三倍體,有一個異常的近端著絲點(diǎn)染色體。 間接免疫熒光法測BEL-7402細(xì)胞內(nèi)的AFP為陽性反應(yīng)。 LDH同工酶譜顯示與成年人肝細(xì)胞不同,而與人胚肝及臨床肝癌相近。
BEL-7402細(xì)胞|慧穎科研用|人肝癌細(xì)胞 操作說明:
懸浮生長細(xì)胞的傳代:直接直接吸去或離心后吸去培養(yǎng)上清液,用新鮮培養(yǎng)液懸浮細(xì)胞,1:3或1:5稀釋細(xì)胞后,分瓶繼續(xù)培養(yǎng)。
貼壁生長細(xì)胞的傳代:吸去培養(yǎng)液,用PBS洗滌細(xì)胞一次,加入消化液,在37℃中消化約3~10分鐘,待細(xì)胞開始脫落時(shí),倒去消化液,加入新鮮培養(yǎng)液,懸浮和吹打分散細(xì)胞。也可以待細(xì)胞*消化脫落,500×g離心5分鐘,去除消化液,用新鮮培養(yǎng)液懸浮細(xì)胞。1:3或1:5稀釋細(xì)胞后,分瓶繼續(xù)培養(yǎng)。
2)細(xì)胞株的凍存:
1. 取培養(yǎng)2~3天生長旺盛的細(xì)胞,用細(xì)胞培養(yǎng)液將細(xì)胞配成2×106~2×107/ml。
2. 在1ml細(xì)胞凍存管中加入0.5ml細(xì)胞懸液,0.4ml小牛血清和0.1ml二甲基亞砜(或甘油),混勻后密封。置4℃ 1小時(shí),-20℃ 2小時(shí),然后直接放入液氮中或置液氮蒸汽上隔夜后浸入液氮中。
3)細(xì)胞株的復(fù)蘇:復(fù)蘇時(shí),從液氮中取出凍存管,立即置37℃水浴中融化細(xì)胞。將細(xì)胞直接加入10ml含15%小牛血清的RPMI-1640培養(yǎng)液中,置37℃ 5%CO2飽和水汽二氧化碳培養(yǎng)箱中培養(yǎng)。懸浮細(xì)胞待細(xì)胞全部沉降后小心吸去上清液,更換新鮮的上述培養(yǎng)液,繼續(xù)培養(yǎng);帖壁細(xì)胞則培養(yǎng)2~3小時(shí),待細(xì)胞帖壁后,倒去培養(yǎng)液,更換新鮮的上述培養(yǎng)液,繼續(xù)培養(yǎng)。也可以在加入新鮮培養(yǎng)液以后,500×g離心5分鐘,去上清液,加入新鮮培養(yǎng)液,繼續(xù)培養(yǎng)。
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