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1.收到elisa試劑盒后應(yīng)按標(biāo)簽說明書儲存,elisa試劑盒在使用前應(yīng)于室溫(22-27℃)下充分回溫,回溫時間為40-60分鐘。回溫過程中勿將酶標(biāo)板的包裝袋開封,回溫結(jié)束后再將其從包裝袋中取出使用。稀稀過后的標(biāo)準(zhǔn)品應(yīng)丟棄,不可保存。
2.實驗中不用的板條應(yīng)立即放回包裝袋中,密封保存,以免變質(zhì)。封板膜只限一次性使用,以避免交叉污染。
3.不用的其它試劑應(yīng)包裝好或蓋好。不同批號的試劑不要混用。保質(zhì)前使用。底物請避光保存。
4.使用一次性的吸頭以免交叉污染,吸取終止液和底物A、B液時,避免使用帶金屬部分的加樣器。
5.使用干凈的塑料容器配置洗滌液。使用前充分混勻elisa試劑盒里的各種成份及樣品。
6.樣品稀釋應(yīng)嚴(yán)格按照說明書要求的稀釋倍數(shù)進行稀釋。如稀釋倍數(shù)過大,可采用多步法進行樣品稀釋。例如:elisa試劑盒要求樣品需進行500倍稀釋,可吸取5μl樣品加入245μl樣品稀釋液中,充分混勻后,再吸取10μl混合液加入90μl樣品稀釋液中即可。
7.稀釋好的樣品在加入酶標(biāo)板進行孵育的過程中,盡可能縮短*次加樣和zui后一次加樣的時間間隔,樣品加好后馬上開始計時。
8.樣品孵育時間結(jié)束后,馬上甩去孔內(nèi)液體。如多塊酶標(biāo)板需同時洗滌,可先將板內(nèi)液體甩去,倒扣于吸水紙上,再依次進行洗滌。使用洗板機洗滌時,建議洗滌次數(shù)增加一次。未用完的洗滌可4℃-8℃下密封保存1月。洗滌酶標(biāo)板時應(yīng)充分拍干,不要將吸水紙直接放入酶標(biāo)反應(yīng)孔中吸水。
9.底物A應(yīng)揮發(fā),避免長時間打開蓋子。底物B對光敏感,避免長時間暴露于光下。避免用手接觸,有毒。實驗完成后應(yīng)立即讀取OD值。試驗結(jié)果判定必須以酶標(biāo)儀讀數(shù)為準(zhǔn),加入終止液后立即讀數(shù)。
10.加入試劑的順序應(yīng)一致,以保證所有反應(yīng)板孔溫育的時間一樣。其中移液器應(yīng)正確使用、保存、清潔、校對。
11.應(yīng)按elisa試劑盒中說明書標(biāo)明的時間、加液的量及順序進行溫育操作。如中文與英文說明書有異,以英文說明書為準(zhǔn)。
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