細胞活力檢測

    在細胞群體中總有一些因各種原因而死亡的細胞，總細胞中活細胞所占的百分比叫做細胞活力。由組織中分離細胞一般要檢查活力，以了解分離的過程對細胞是否有損傷作用；復(fù)蘇后的細胞也要檢查活力，了解凍存和復(fù)蘇的效果。細胞懸液制備后，zui常用活體染料臺盼藍對細胞染色，進行細胞計數(shù)。

    正常細胞胞膜完整，臺盼藍不能透過活細胞正常完整的細胞膜，故活細胞不著色；而喪失活性或細胞膜不完整的細胞胞膜通透性增加，臺盼藍能進入細胞內(nèi)而使細胞著色（藍色）。

操作步驟：

1. 配制4%臺盼藍母液：稱取4g臺盼藍，加少量蒸餾水研磨，加雙蒸水至100mL，用濾紙過濾，4℃保存。使用時用PBS稀釋至0.4%。

2. 胰酶消化貼壁細胞，制備單細胞懸液，并作適當(dāng)稀釋（106 cells/mL）。

3. 取少量細胞懸液與0.4%臺盼藍溶液以9:1混合，輕輕吹打混勻，染色2~3min。

4. 顯微鏡下觀察，死細胞著淺藍色并膨大，無光澤；活細胞保持正常形態(tài)，無色透明有光澤。若需計算活細胞率則將染色的細胞懸液滴入細胞計數(shù)板計數(shù)。

活細胞率（%）= 活細胞總數(shù)/（活細胞總數(shù)+死細胞總數(shù)）×100%

注意事項：臺盼藍染細胞時，時間不宜過長。否則，部分活細胞也會著色，會干擾計數(shù)的準(zhǔn)確性。