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HMEC-1，人微血管內(nèi)皮細(xì)胞 消化要有個(gè)度
產(chǎn)品代號(hào)：HMEC-1
中文名稱：人微血管內(nèi)皮細(xì)胞
種屬：人
是否鑒定：已鑒定
庫存狀態(tài)：現(xiàn)貨
慧穎生物提供2000種類細(xì)胞株細(xì)胞系，400多株已鑒定細(xì)胞，涉及種屬：人，大鼠，小鼠，兔子，魚，牛，倉鼠等，我們提供好的產(chǎn)品，好的服務(wù)，好的技術(shù)，復(fù)蘇周期短，*，細(xì)胞狀態(tài)良好，飽滿，有光澤，無支原體。
HMEC-1，人微血管內(nèi)皮細(xì)胞 消化要有個(gè)度
細(xì)胞培養(yǎng)，尤其是細(xì)胞系的培養(yǎng)，就細(xì)胞消化而言，多做、善于總結(jié)，就可以把細(xì)胞養(yǎng)的越來越好
絕大部分細(xì)胞消化只要用胰酶潤洗一遍即可：
吸去胰酶后，殘留的那些無法計(jì)算體積的附著在細(xì)胞表面的微量胰酶在37度一般不到2min足夠消化細(xì)胞（絕大部分1min不到）。對(duì)于這些細(xì)胞原則上不要用胰酶孵育細(xì)胞，連續(xù)這樣傳代，對(duì)細(xì)胞傷害很大。簡單的程序是PBS潤洗吸去，胰酶潤洗吸去，然后37度消化。
什么算是消化好了呢？
不需要把細(xì)胞全部消化成間隔分布很離散的單個(gè)圓形才算消化好了，一般你肉眼觀察貼壁細(xì)胞層，只要能移動(dòng)了，多半呈沙壯移動(dòng)，其實(shí)已經(jīng)可以了。
一般能移動(dòng)了，說明細(xì)胞與培養(yǎng)基質(zhì)材料的附著已經(jīng)消失了，細(xì)胞之間的附著也已經(jīng)消失了，細(xì)胞已經(jīng)獨(dú)立分布了（雖然沒有呈現(xiàn)很廣的離散分布）。這個(gè)時(shí)候應(yīng)該停止消化，不要等到看到鏡下所有細(xì)胞都分離得非常好，間隙很大，才停止。
細(xì)胞就是*成單個(gè)細(xì)胞懸液，之后在貼壁的過程中仍然會(huì)聚集，這個(gè)是貼壁培養(yǎng)的細(xì)胞，尤其是腫瘤細(xì)胞的一個(gè)特性，你可以嘗試，準(zhǔn)備100%的單個(gè)細(xì)胞懸液，貼壁后觀察細(xì)胞，仍然是幾個(gè)幾個(gè)細(xì)胞聚集在一起。
一些懸浮培養(yǎng)細(xì)胞也是如此，容易聚集，不要過幾個(gè)小時(shí)就拿出來吹打成單細(xì)胞懸液。細(xì)胞只要能從基質(zhì)上脫離下來，即使是成片的（比如Calu-3細(xì)胞），吹打不超過20次（一般10次即可），成小規(guī)模聚集（10個(gè)細(xì)胞左右）是正常的，不要再去延長消化時(shí)間，等待單細(xì)胞懸液出現(xiàn)。
比較難消化的細(xì)胞：
潤洗方法5min還不能消化，以結(jié)腸癌細(xì)胞為例，比如HCT15、LS411和KM12細(xì)胞，胰酶消化，一般10 cm 培養(yǎng)皿，一次多加入300ul-500ul就足夠了。即使這樣難消化的細(xì)胞，一般不超過5min，即可見細(xì)胞成片移動(dòng)，就應(yīng)該停止消化。一些正常細(xì)胞也會(huì)有難消化的時(shí)候，比如tsDC細(xì)胞，用胰酶孵育，3min左右即可看到成片沙狀移動(dòng)。
常規(guī)的細(xì)胞實(shí)驗(yàn)，受消化影響不是很大：
如果不用胰酶去孵育而使用潤洗的方法消化的話（難消化細(xì)胞例外）。但少數(shù)實(shí)驗(yàn)，比如病毒包裝，對(duì)細(xì)胞代數(shù)，對(duì)細(xì)胞狀態(tài)要求*。這個(gè)時(shí)候，胰酶消化，就是潤洗，都會(huì)對(duì)細(xì)胞包裝病毒的能力有影響，傳代次數(shù)一多，細(xì)胞包裝能力就會(huì)逐漸下降。這個(gè)時(shí)候都不用胰酶消化，用一些鹽溶液（不是EDTA液）即可。這些鹽溶液通過影響細(xì)胞外基質(zhì)相關(guān)酶的活性，來使得細(xì)胞脫離基質(zhì)附著表面，但不切割任何蛋白。
EDTA的作用：
許多人不用胰酶，只用EDTA，或者用胰酶/EDTA聯(lián)合作用。這里要明白，胰酶切割細(xì)胞外基質(zhì)的一些負(fù)責(zé)粘連和附著的蛋白，而EDTA通過螯合Ca離子，作用于整聯(lián)蛋白的活性，所以EDTA的作用更加溫和。有的人在胰酶里添加一些EDTA，或者對(duì)付特別難消化的細(xì)胞，添加多一些EDTA，就是這個(gè)道理。一般不要試圖延長消化時(shí)間（如果10min還消化不*的話），而應(yīng)該想其它辦法。
PBS洗滌：
消化之前用PBS洗滌，是常見的操作，因?yàn)檠逯泻幸种埔让傅牡鞍住?duì)于一些難消化細(xì)胞，可以配制不含Ca，Mg離子的PBS，因?yàn)檫@些離子也會(huì)抑制胰酶的活性。但對(duì)于絕大部分細(xì)胞用胰酶或者EDTA溶液潤洗即可消化，不需要配制不含Ca，Mg離子的溶液。
細(xì)胞代號(hào) 細(xì)胞名稱 種屬 鑒定結(jié)果
HMEC-1，人微血管內(nèi)皮細(xì)胞 消化要有個(gè)度
編號(hào) 中文名稱 是否鑒定
5637 人膀胱癌細(xì)胞 人 √
7703 人肝癌細(xì)胞 人 √
143B 人骨肉瘤細(xì)胞 人 √
22RV1 人前列腺癌細(xì)胞 人 √
293FT 人胚腎細(xì)胞 人 √
293T 人胚腎細(xì)胞 人 √
435S 人乳腺癌細(xì)胞/人黑素瘤細(xì)胞 人 √
453 人乳腺癌細(xì)胞 人 √
6T-CEM 人T細(xì)胞白血病細(xì)胞 人 √
769-P 人腎細(xì)胞腺癌細(xì)胞 人 √
786-O 人腎透明細(xì)胞腺癌細(xì)胞 人 √
95-D 人高轉(zhuǎn)移肺癌細(xì)胞 人 √
97H 人高轉(zhuǎn)移性肝癌細(xì)胞 人 √
A172 人膠質(zhì)母細(xì)胞瘤細(xì)胞 人 √
A2058 人黑色素瘤細(xì)胞 人 √
A2780 人卵巢癌細(xì)胞 人 √
A375 人黑色素瘤細(xì)胞株 人 √
A431 人表皮癌細(xì)胞 人 √
A498 人腎癌細(xì)胞 人 √
A549 人非小細(xì)胞肺癌細(xì) 人 √
A-673 人橫紋肌肉瘤細(xì)胞 人 √
ACHN 人腎細(xì)胞腺癌細(xì)胞 人 √
AGS 人胃腺癌細(xì)胞 人 √
AN3CA 人子宮內(nèi)膜腺癌(轉(zhuǎn)移)細(xì)胞 人 √
ARH-77 人漿細(xì)胞白血病 人 √
ARO 沒有，找不到信息 人 √
ARPE-19 人視網(wǎng)膜上皮細(xì)胞 人 √
B-CPAP 人甲狀腺癌細(xì)胞 人 √
BEAS-2b 人正常肺上皮細(xì)胞 人 √
BEWO 人絨毛膜腫瘤細(xì)胞 人 √
BGC-823 人胃腺癌細(xì)胞(低分化) 人 √
BT-474 人乳腺導(dǎo)管癌細(xì)胞 人 √
BT-549 人乳腺管癌細(xì)胞 人 √
BXPC-3 人原位胰腺腺癌細(xì)胞 人 √
C-33 A 人子宮頸癌細(xì)胞 人 √
C643 人甲狀腺癌細(xì)胞 人 √
C8166 人T淋巴細(xì)胞白血病細(xì)胞 人 √
Ca Ski 人宮頸癌腸轉(zhuǎn)移細(xì)胞/人宮頸癌上皮細(xì)胞 人 √
Caco2 人結(jié)直腸腺癌細(xì)胞 人 √
CAKI-1 人腎透明細(xì)胞癌皮膚轉(zhuǎn)移細(xì)胞 人 √
cal-27 人舌鱗癌細(xì)胞 人 √
CALU-1 人肺癌細(xì)胞 人 √
CALU-3 人肺腺癌細(xì)胞(胸水) 人 √
CCD-1095SK 人乳腺浸潤性導(dǎo)管癌旁皮膚細(xì)胞 人 √
CCRF-CEM 人急性淋巴細(xì)胞白血病T淋巴細(xì)胞 人 √
CEM/C1 人急性淋巴細(xì)胞白血病細(xì)胞 人 √
CFPAC-1 人胰腺癌細(xì)胞 人 √
CNE1 人鼻咽癌細(xì)胞 人 √
CNE2 人鼻咽癌細(xì)胞 人 √
COLO 205 人結(jié)腸癌細(xì)胞 人 √
COLO 320DM 人結(jié)直腸腺癌細(xì)胞 人 √
CW-2 人結(jié)腸腺癌細(xì)胞 人 √
DAOY Daoy細(xì)胞，具體不清楚 人 √
DAUDI 人Burkitt's淋巴瘤細(xì)胞 人 √
DETROIT 562 人咽頭癌胸水轉(zhuǎn)移細(xì)胞 人 √
DLD-1 人結(jié)直腸腺癌上皮細(xì)胞 人 √
DU 145 人前列腺癌細(xì)胞 人 √
EA.HY926 人臍靜脈細(xì)胞融合細(xì)胞 人 √
ECV304 人臍靜脈內(nèi)皮細(xì)胞 人 √
ES-2 人卵巢透明細(xì)胞癌細(xì)胞 人 √
FADU 人咽鱗癌細(xì)胞 人 √
FTC-133 人濾泡性甲狀腺癌細(xì)胞 人 √
GBC-SD 人膽囊癌細(xì)胞 人 √
GCIY 人 √
H1299 人非小細(xì)胞肺癌細(xì)胞 人 √
H1395 人肺腺癌細(xì)胞 人 √
H1650 人非小細(xì)胞肺癌細(xì)胞 人 √
H1703 人肺鱗癌細(xì)胞 人 √
H1755 人肺癌細(xì)胞 人 √
H1944 人非小細(xì)胞肺癌細(xì)胞 人 √
H1975 人肺腺癌細(xì)胞 人 √
H2170 人肺鱗癌細(xì)胞 人 √
H226 人肺鱗癌細(xì)胞 人 √
H292 人肺癌細(xì)胞(淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移) 人 √
H358 人非小細(xì)胞肺癌細(xì)胞 人 √
H460 人大細(xì)胞肺癌細(xì)胞 人 √
H520 人肺鱗癌細(xì)胞 人 √
H596 人肺腺鱗癌細(xì)胞 人 √
H661 人大細(xì)胞肺癌細(xì)胞 人 √
H716 人結(jié)直腸腺癌細(xì)胞 人 √
H838 人非小細(xì)胞肺癌細(xì)胞 人 √
Hacat 人永生化角質(zhì)形成細(xì)胞 人 √
HBE 人支氣管上皮樣細(xì)胞 人 √
HBL-100 人整合SV40基因的乳腺上皮細(xì)胞 人 √
HCC1937 人乳腺癌細(xì)胞 人 √
HCC827 人非小細(xì)胞肺癌細(xì)胞 人 √
HCCC-9810 人膽管細(xì)胞型肝癌細(xì)胞 人 √
HCCLM3 人高轉(zhuǎn)移肝癌細(xì)胞 人 √
HCT-116 人結(jié)腸癌細(xì)胞 人 √
HCT-8 人回盲腸癌細(xì)胞 人 √
HEC-1-A 人子宮內(nèi)膜腺癌細(xì)胞 人 √
HEC-1-B 人子宮內(nèi)膜腺癌細(xì)胞 人 √
HEK-293 人胚腎細(xì)胞 人 √
HEL 人紅白細(xì)胞白血病細(xì)胞 人 √
HELA229 人宮頸癌復(fù)蘇細(xì)胞 人 √
Hela-J 人 √
Hep G2 人肝癌細(xì)胞 人 √
HEP-2 人喉表皮樣癌細(xì)胞 人 √
HEP3B 人肝癌細(xì)胞 人 √
HEY 人卵巢癌細(xì)胞 人 √
HFF 人包皮成纖維細(xì)胞 人 √
HFL1 人胚肺成纖維細(xì)胞 人 √
HFOB1.19 人SV40轉(zhuǎn)染成骨細(xì)胞 人 √
HGC-27 人胃癌細(xì)胞(未分化) 人 √
HK-2 人腎皮質(zhì)近曲小管上皮細(xì)胞 人 √
HL-60 人原髓細(xì)胞白血病細(xì)胞 人 √
HMEC-1 人微血管內(nèi)皮細(xì)胞 人 √
HO-8910 人卵巢癌細(xì)胞 人 √
HPN1 人 √
HS683 細(xì)胞人腦視神經(jīng)膠質(zhì)瘤細(xì)胞 人 √
Hs888Lu 人肺成纖維細(xì)胞 人 √
HT-1080 人纖維肉瘤細(xì)胞 人 √
HT-29 人結(jié)腸癌細(xì)胞 人 √
HT-3 人 √
HTR8 人滋養(yǎng)細(xì)胞 人 √
HUCCT1 膽管上皮癌細(xì)胞 人 √
HuH-6 人肝母細(xì)胞瘤細(xì)胞 人 √
HUH-7 人肝癌細(xì)胞 人 √
HUT78 人T淋巴細(xì)胞白血病細(xì)胞 人 √
HUVEC-C 人臍靜脈內(nèi)皮細(xì)胞 人 √
ISK 人 √
JAR 人 √
JEG-3 人 √
JEKO-1 人 √
Jurkat，Clone E6-1 人 √
K-562 人 √
KATO III 人 √
KLE 人 √
KTC-1 人 √
KU812 人 √
KYSE-150 人 √
LI-7 人 √
LNcap clone FGC 人 √
L-O2 人 √
LOVO 人 √
LS 174T 人 √
MCF10A 人 √
MCF-7 人 √
MDA-MB-231 人 √
MDA-MB-231(DMEM) 人 √
MDA-MB-231(L-15) 人 √
MDA-MB-436 人 √
MDA-MB-468 人 √
MG-63 人 √
MGC-803 人 √
MIA PaCa-2 人 √
MM.1S 人 √
MNNG/HOS Cl #5 人 √
MRC-5 人 √
MV4-11 人 √
N87 人 √
NCI-H1299 人 √
NCI-H1563 人 √
NCI-H2452 人 √
NCI-H647 人 √
NK-92 人 √
NTHY-ORI-31 人 √
OCM1A 人 √
OS-RC-2 人 √
OVCAR-3 人 √
PANC-1 人 √
PC-3 人 √
PC-3M 人 √
PC-9 人 √
PLC/PRF/5 人 √
Raji 人 √
RBE 人 √
RD 人 √
RKO 人 √
RL95-2 人 √
RT4 人 √
RWPE-1 人 √
SAOS-2 人 √
SH-SY5Y 人 √
SiHa 人 √
SJCRH30 人 √
SK-BR-3 人 √
SK-HEP-1 人 √
SK-MES-1 人 √
SK-N-BE(2) 人 √
SK-NEP-1 人 √
SK-N-SH 人 √
SK-OV-3 人 √
SPC-A-1 人 √
SU-DHL-6 人 √
SV-HUC-1 人 √
SW 1990 人 √
SW1353 √
SW480 人 √
SW579 人 √
SW620 人 √
SW-620 人 √
SW839 人 √
SW982 人 √
T/G HA-VSMC 人 √
T-24 人 √
T47D 人 √
T82 人 √
T84 人 √
TCA-8113 人 √
TE 353.Sk 人 √
TE-1 人 √
THP-1 人 √
TMK1 人 √
TPC-1 人 √
TT 人 √
TTA1 人 √
U-118MG 人 √
U-2 OS 人 √
U251 人 √
U87 人 √
U-87MG 人 √
U-937 人 √
UM-UC-3 人 √
VCAP 人 √
WERI-RB-1 人 √
WI-38 人 √
WISH 人 √
WPMY-1 √
ZR-75-1 人 √
ZR-75-30 人 √
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